5—羥甲基糠醛（5—Hydroxymethyl furfural，簡(jiǎn)稱5—HMF）是葡萄糖等單糖化合物在高溫或弱酸等條件下脫水產(chǎn)生的一個(gè)醛類化合物。該化合物穩(wěn)定性不好，容易分解成乙酰丙酸和甲酸，或發(fā)生聚合反應(yīng)。一方面，5—HMF對(duì)人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害；另一方面，葡萄糖注射液在高溫情況下顏色容易變黃，雖然5—HMF本身無(wú)色，但由于5—HMF可發(fā)生聚合而由聚合物導(dǎo)致變色，且葡萄糖注射液顏色的深淺與5—HMF產(chǎn)生量成正比。

    　5—HMF的量可指代產(chǎn)品中葡萄糖的分解程度，葡萄糖有α—葡萄糖和β—葡萄糖兩個(gè)異構(gòu)體，它們與鏈?zhǔn)浇Y(jié)構(gòu)A存在平衡，通過(guò)鏈?zhǔn)浇Y(jié)構(gòu)A可生成大量的四氫呋喃類物質(zhì)。經(jīng)過(guò)脫水反應(yīng)后生成 5—羥甲基糠醛， 5—羥甲基糠醛受熱后再生成 5—甲基糠醛、糠醛和其它呋喃類物質(zhì)。因此，糠醛、 5—甲基糠醛和 5—羥甲基糠醛是葡萄糖 主要裂解產(chǎn)物。5—羥甲基糠醛含量指標(biāo)控制為小于300ppm。

    　1 試劑

    　乙酸乙酯、乙腈 、乙酸、乙酸鹽緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)品：5—羥甲基糠醛純度＞99%、5—羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、5—羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)工作液。
    　1.1 冰醋酸（分析純）；
    　1.2 乙酸乙酯（分析純）；
    　1.3 乙腈：色譜純  一級(jí)品  含量>99.9%；
    　1.4 醋酸溶液：c（CH3COOH）=0.2mol/L；
      1.5 醋酸鈉溶液：c（CH3COONa）=0.2mol/L；
    　1.6 醋酸鹽緩沖溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液：醋酸鈉水溶液=164：36（v/v）；
    　無(wú)水碳酸鈉溶液：c（Na2CO3）=14g/L。

圖譜1

峰參數(shù)1

圖譜2

峰參數(shù)2

    　2 檢驗(yàn)步驟

    　2 .1試樣溶液的制備：

　　稱取試樣4. 8g―5. 2g，置于125ml的心形瓶中，用約25ml蒸餾水稀釋，然后加入30ml乙酸乙酯振蕩5min，靜置分層。將水層放入另一個(gè)心形瓶中，用30ml乙酸乙酯重復(fù)萃取兩次，棄去水層，合并三次乙酸乙酯萃取液于另一心形瓶中，再加入10ml碳酸鈉水溶液立即振蕩，靜置分層（此凈化操作應(yīng)在文章來(lái)源華夏酒報(bào)2min內(nèi)完成）。再用20ml乙酸乙酯提取碳酸鈉水層一次。棄去碳酸鈉水層，合并乙酸乙酯提取液，并加入9滴冰醋酸，全部轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器內(nèi)，于40℃―45℃下，蒸至剩余溶液約為1ml―2ml時(shí)，卸下心形瓶，在40℃下用氮?dú)獯蹈桑?ml醋酸鹽緩沖溶液溶解殘留物，用帶有0.45μm水系濾膜的針頭式過(guò)濾器濾入樣品瓶，作為試樣溶液。如果試樣溶液不能及時(shí)測(cè)試時(shí)，應(yīng)先存放在冰箱中冷藏，但不得超過(guò)48小時(shí)。

    　2 .2  5—羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制：
　　稱取10mg的羥甲基糠醛，用乙酸鹽緩沖溶液稀釋成100ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

    　2 .3  5—羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)工作液配制：
　　將上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液再用乙酸鹽緩沖溶液配制成濃度為10ug/ml標(biāo)準(zhǔn)工作液。

    　3 儀器
    　美國(guó)戴安公司生產(chǎn)ICS300離子色譜，Ultimate3000 varible waveleng detector紫外檢測(cè)器。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、一次性濾膜0.45um 、1ml—5ml、5ml—10ml加樣槍，色譜柱Diamonsil5uc18　250×4.6mm，美國(guó)密理博公司生產(chǎn)的Direct—Q3超純水機(jī)。

    　4 色譜條件
    　ICS300離子色譜、紫外檢測(cè)器、5uc18  250×4.6mm色譜柱。
    　流動(dòng)相: 乙腈：水=10：90（v/v）；
    　流速： 1.0ml/min；
    　柱溫：35℃；
    　檢測(cè)波長(zhǎng)： 276nm；
    　進(jìn)樣體積： 10μl；
    　保留時(shí)間：羥甲基糠醛5.2min。
    　上述操作參數(shù)可根據(jù)儀器情況對(duì)給定的參數(shù)做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以期獲得最佳效果。

    　5 色譜測(cè)定
    　準(zhǔn)確注射10uL樣液于離子色譜儀中，進(jìn)行分析，響應(yīng)值均在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定，以外標(biāo)法定量。在色譜條件下，5—羥甲基糠醛保留時(shí)間5. 2分鐘左右。

    　從上述分析情況來(lái)看，果汁中5—羥甲基糠醛的含量很低。主要是要在果汁的壓榨工藝過(guò)程中，在高溫或弱酸條件下脫水等工藝條件及衛(wèi)生條件的嚴(yán)格控制下，最大程度上降低5—羥甲基糠醛成分的產(chǎn)生。